造成ELISA试剂盒实验结果不乐观的因素：

A、试剂盒没有按规定进行保存，受高温影响。

B、试剂盒、样品用前未平衡至室温。

C、加入试剂的体积和时间有误，移液器计量不准，吸嘴内水分太多或不清洁。

D、必须在有效期内使用，超过有效期的产品可能会产生很弱的信号。

E、孵育时间及孵育温度未达到要求，反应板放入培养箱时注意温度并及时调整。

F、洗板及加样过程中，酶标受污染失活而失去催化显色剂显色的能力。

G、蒸馏水水质有问题。

H、洗板次数过多，或浓缩洗液稀释倍数不符合要求，洗涤冲击力太大，浸泡时间太长。

I、显色剂加量不足或顺序颠倒，或混合后加入。

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